Пособие по физиологии

Определяют число лейкоцитов у двух групп испытуемых: у одних натощак, а у других—спустя 2 ч после еды. Наконец, на третьей группе испытуемых проверяют наличие условно-рефлекторного лейкоцитоза. Кровь для исследования берется до условного раздражения и через 30 мин после его действия. В качестве натурального (естественного) условного раздражителя применяют приготовление самим же испытуемым горячего завтрака (например, яичницу с колбасой). Впервые условно-рефлекторный лейкоцитоз бь.л открыт И. В. Завадским с сотрудниками (1923). Вследствие наличия пищеварительного лейкоцитоза кровь для клинического анализа берут натощак.

Задача. Овладеть техникой подсчета лейкоцитов и выяснить влияние еды с аппетитом на число лейкоцитов и их движение.
Исследование. 1. Техника подсчета лейкоцитов. Набрав кровь в специальный смеситель для лейкоцитов до метки 0,5 и добавляя жидкость Тюрка до метки 11, ее разводят в 20 раз. (Состав жидкости Тюрка: ледяной уксусной кислоты 3 мл, 1%-ного водного раствора генцианвиолета 3,3 мл9 дистиллированной воды 300 мл). Уксусная кислота в жидкости Тюрка гемолизирует форменные элементы крови, а генцианвиолет окрашивает ядра лейкоцитов. Так как капилляр у смесителя широкий, то укол пальца иглой Дженера делают поглубже и каплю крови собирают покрупнее. Смеситель держат горизонтально. Правильно набрав кровь, закрывают пальцем конец смесителя, снимают его резиновую трубку, зажимают второй конец и для равномерного распределения ядер покачивают смеситель в течение 3 мин. Подготавливают счетную камеру. Удалив из смесителя первые капли, примерно четвертую подводят под покровное стекло счетной камеры. Чтобы не вытекло все содержимое смесителя, верхнее отверстие его прикрывают пальцем. Подсчет ядер лейкоцитов ведется при малом увеличении микроскоспа в 100 больших квадратах.
Так как в одном большом квадрате находится 16 маленьких, то объем пространства над одним большим составит. 1/4000 х 16 =16/4000 куб. мм, а над 100 большими квадратами 1600/4000 куб. мм. Предложим, что в этом объеме (1600/4000) найдено 150 ядер лейкоцитов, тогда з 1 куб. мм цельной крови (которая при подсчете разводилась в 20 раз) их будет 7500.
Следовательно, найденное количество лейкоцитов в 100 больших квадратах, надо умножить на 50.